在斑馬魚中,實現基因過表達的一個常見方法就是通過向胚胎內注射體外合成的mRNA,并通過觀察表型推測目的基因的功能。轉錄通常發生在生物體內,在體外無細胞系統中,如果我們將含有 RNA 轉錄酶、NTP 等條件,用 DNA 作為模板,模仿體內轉錄過程生成 RNA,這樣的技術則能夠控制轉錄的基因、轉錄的過程和轉錄后 RNA 的用途,該技術被稱為體外轉錄。將體外轉錄獲得的編碼目的蛋白的 mRNA 導入剛剛開始發育兩小時的斑馬魚胚胎內,可以實現斑馬魚胚胎的早期階段(直到發育的第三天)進行特定蛋白的短期過表達[15]。如果注射內源基因的 mRNA,可進行過表達分析。例如,BMP 分子的濃度梯度影響斑馬魚背側和腹側的發育,BMP 分子表達量高的區域將發育為腹部,表達量低的一側,發育為背部。如果在胚胎中注射 bmp4 基因的 mRNA ,胚胎將產生腹部化表型。如果注射某些內源基因顯性負調控(dominant negative)的突變型 mRNA,則可干擾正?;虻墓δ苓M行顯性負調控分析。盡管通過 mRNA 注射來實現蛋白的短期表達可以快速簡便地在斑馬魚早期發育過程中進行蛋白定位和功能研究,這種方法卻不適合在發育晚期或是目的蛋白必須在特定組織和細胞中進行表達時使用。
百維斯提供從同源基因分析到信號通路機制分析的全流程基因過表達服務,利用斑馬魚的優勢,最快可在 4-5 月內獲得表型分析結果,大大縮短實驗周期。